色譜分析是以假定給定組分的保留值在分離條件不變時(shí)保留值恒定為基礎(chǔ)的。對標(biāo)準(zhǔn)的液相色譜程序而言，每個(gè)峰都對應(yīng)于一個(gè)組分，以標(biāo)準(zhǔn)品與樣品中組分的保留時(shí)間相對應(yīng)進(jìn)行鑒別。恒定的保留時(shí)間對分析設(shè)計(jì)排列的樣品很重要。

　　在液相色譜儀分析中常涉及到組分的保留值。保留值發(fā)生改變可使已建立的方法不能繼續(xù)進(jìn)行下去，或引起分析周期太長，或者峰分不開。應(yīng)該找出引起保留值變化的原因。

　　除上述條件之外，引起保留變化的原因主要包括下列3種：

　　柱-柱之間;

　　日-日或日內(nèi)：保留時(shí)間可能隨時(shí)間而變化，如溫度、柱溫、pH值等對柱性能有影響，通常是所有的峰提前或延遲。

　　樣品-樣品間：偶爾也有樣品與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間不同，可能是樣品介質(zhì)的影響。

　　以下重點(diǎn)討論造成日-日間和日內(nèi)保留時(shí)間變化的影響因素，它們主要是：

　　a、分離條件控制差

　　除了色譜柱外，保留是溫度、流動(dòng)相組成和流速的綜合體現(xiàn)，如果有一個(gè)條件變化，保留時(shí)間也會(huì)隨之發(fā)生變化。

　　b、柱平衡慢

　　流動(dòng)相組成或溫度變化時(shí)，柱在新條件下再平衡需要一定的時(shí)間，在柱達(dá)到完全平衡錢不應(yīng)進(jìn)樣。

　　c、柱鈍化

　　長時(shí)間進(jìn)樣，柱會(huì)退化，強(qiáng)保留組分被柱不可逆的保留，導(dǎo)致所有組分保留減少。鍵合相層從填料微粒上剝落下來，會(huì)導(dǎo)致某些組分的保留增加，而另一組分的保留減少。

　　d、柱過載和樣品介質(zhì)相互作用

　　過大的樣品量超出柱的線性范圍，使保留減少。也可能是樣品本身過載，從其它方面影響保留。