發布日期:2022-04-17 點擊率:120
二硫蘇糖醇(Dithiothreitol,簡稱為DTT),外觀為白色粉末,CAS號: 3483-12-3,是一種小分子有機還原劑,被廣泛應用于細胞生物學、生物化學和生物醫學應用領域。
二硫蘇糖醇(DTT)是一種很強的還原劑,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態六元環(含二硫鍵)的構象穩定性。二硫蘇糖醇對一個典型的二硫鍵的還原是由兩步連續的巰基-二硫鍵交換反應所組成。二硫蘇糖醇(DTT)的還原力受pH值的影響,只在pH值大于7的情況下能夠發揮還原作用。這是因為只有脫去質子的硫醇鹽負離子才具有反應活性,硫醇則沒有,而巰基的pKa一般為8.3。
二硫蘇糖醇(DTT)常用于還原蛋白分子和多肽的二硫鍵,通常作為蛋白質巰基保護劑,在疫苗制劑中用于防止蛋白半胱氨酸殘基形成分子內和分子間的二硫鍵。在核酸檢測過程中二硫蘇糖醇(DTT)可破壞RNase蛋白質中的二硫鍵,使RNA酶變性,有助于如RNA建庫,RNA擴增等實驗的進行。二硫蘇糖醇(DTT)還用于保護細胞和組織解毒劑,輻射防護劑等等。
不過,二硫蘇糖醇(DTT)往往無法還原包埋于蛋白質結構內部(溶劑不可及)的二硫鍵,這類二硫鍵的還原常常需要先將蛋白質變性。
值得說明的是,二硫蘇糖醇(DTT)是一種有毒的物質,例如過渡金屬存在時,二硫蘇糖醇(DTT)會引起生物分子的氧化損傷,同時二硫蘇糖醇(DTT)還可強化一些含砷和汞的化合物毒性。二硫蘇糖醇(DTT)有刺鼻臭味,可因吸入、皮膚接觸而危害健康,因此操作時要做好防護,戴好口罩、手套及護目鏡,并在通風柜內操作。
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